高效液相色谱柱出峰很胖,顶部很圆,柱效也低,怎么处理?

提高高效液相色谱柱效的方法~

1、选用细颗粒的填料,可获得高柱效。
2、降低流动相流速,使得渗透时间变长,有利于达到高柱效。
3、流动相粘度低,溶质在流动相中的扩散系数大,有利于加快传质,可获得高柱效。
4、采用低配比固定液,有利于减小固定相传质阻力,可提高柱效。
5、提高温度,可减小流动相和固定相的粘度,增大组分的扩散系数,改善传质,提高柱效。
6、组分的扩散系数还取决于组分本身的结构,过大分子的扩散系数小,对获得高柱效不利。

扩展资料
高效液相色谱法有“四高一广”的特点:

①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。
②高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。
③高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果,比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。
④高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在μL数量级。
⑤应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析,特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析,显示出优势。
参考资料来源:百度百科-高效液相色谱

柱效指的是色谱的分离效果,其不仅与柱长有一定的关系,主要与色谱柱的填充物有关

高效液相色谱柱柱效过低的现象一般是由于系统泄漏,处理方法:

1、寻找各个接口处,特别是色谱柱两端的接口,把泄漏的地方旋紧即可;
2、当然也可能是泵里进了空气,但此时表现的往往是压力不稳,忽高忽低,更严重一点会导
致泵无法吸上液体。处理方法:打开Purge阀,用3.5ml/min的流速冲洗, 如果不行,则要用专用针筒在排空阀处借住外力将气泡吸出。

高效液相色谱柱的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流
动相载入色谱柱(固定相) 内, 由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数, 在两相中作相对运动时, 经过反复多次的吸附-
解吸的分配过程, 各组分在移动速度上产生较大的差别, 被分离成单个组分依次从柱内流出, 通过检测器时,
样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。

先确定是什么的原因。是C18的色谱柱吗?你用这个条件跑一下图谱:
流动相:乙腈-水(65:35)
流速:1.0ml/min
波长:254nm
进样量:1ul
稀释甲苯进样,别让甲苯峰平头,看看理论塔板数,新柱子的板数基本都在20000
如果板数在6000以下那柱子基本上就废了。反过来用乙腈0.4的流速冲4-5个小时或许能有所改善。
如果板数在8000以上,应该还可以,那就是你试验的条件不太好,查阅一下相关资料,调整实验方法就行。

  流动相:乙腈-水(65:35)
流速:1.0ml/min
波长:254nm
进样量:1ul
稀释甲苯进样,别让甲苯峰平头,看看理论塔板数,新柱子的板数基本都在20000
如果板数在6000以下那柱子基本上就废了。反过来用乙腈0.4的流速冲4-5个小时或许能有所改善。
如果板数在8000以上,应该还可以,那就是你试验的条件不太好,查阅一下相关资料,调整实验方法就行。

你进的是什么样品?描述的太简单了,是标准品出现这样 还是 样品出现这样,另外这个色谱方法您是新建立,还是以前就做实验很好,最近不好了?
可能性1:样品的色谱条件不合适,流动相的和色谱柱都有可能。可以尝试将梯度洗脱设的陡一点。如果是C18 的话,试试换个苯基试试。
可能性2:进样体积过大,柱子超载。减小进样体积,或减小浓度进样试试。

请教一下高效液相色谱出现肩峰,有什么解决办法?
答:使用高效液相色谱时,液体待检测物被注入色谱柱,通过压力在固定相中移动,由于被测物种不同物质与固定相的相互作用不同,不同的物质顺序离开色谱柱,通过检测器得到不同的峰信号,最后通过分析比对这些信号来判断待测物所含有的物质。高效液相色谱作为一种重要的分析方法,广泛地应用于化学和生化分析中。...

高效液相色谱法常出现的故障及解决的方法
答:心部件同时也是易出问题的主要部位。2 常见问题及解决方法。高效液相作为一种高精密仪器,如果在使用过程中不按 照正确操作的话,就容易导致一些问题。其中最常见的就是柱压问题、漂移问题、峰型异常问题。2.1 柱压问题。柱压问题是使用高效液相色谱过程中需要密切注意的地方,柱压 的稳定与色谱图峰形...

高效液相色谱仪检测出来的峰面积偏大怎么回事
答:峰面积和进样量以及仪器的响应灵敏度相关,在色谱分析中,可以说含量,浓度等计算值偏大或偏大,没有峰面积偏大一说吧;如果相同的进样量,相同的条件下,峰面积变大了,则可能是有意或者无意调整了检测器的灵敏度档位了。

高效液相色谱中,为何要校正峰高?
答:在实际样品分析中,样品的浓度、基质效应以及其他实验变量可能会导致峰高发生变化。例如,样品中的其他化合物可能会干扰目标化合物的检测,导致峰高发生变化。高效液相色谱的峰高也受到色谱条件(如流动相组成、流速、柱温等)的影响。如果这些条件发生变化,可能会导致峰高发生相应的变化,从而影响定量结果的...

液相色谱分析出峰扁平是什么原因
答:意思是峰高/峰宽值较小的意思,还是峰顶出现平头?如果是前者,影响的因素就比较多了:柱效不足,流动相不适宜(包括有机相比例,PH值,离子对试剂浓度等),柱温不足等等。简单说就是色谱条件不好。处理方法就是优化色谱系统,这个解决起来就不是一两句能说清的了。如果是后者,是因为超出了检测器...

液相色谱柱出现这样的峰是怎么回事,如何解决?
答:有两种可能 是样品问题。是方法问题。解决方案:如果是后者,那么换一根柱子试试。如果是前者,重新配样。如果是后者,那么换一根柱子试试。最好的溶剂是流动相,千万不要用纯有机相去溶解样品。原因是溶解度不同,样品可能进柱子之后析出来。一个是pH值和极性不同,可能会导致肩峰。

高效液相分析是为什么会出现肩峰?
答:有几种可能:\x0d\x0a浓度过载。就是样品浓度太高,所以会出现肩峰。\x0d\x0a色谱柱填料塌陷。简单说就是柱子坏了,这样的话可能你图谱中所有的色谱峰都是有肩峰的。\x0d\x0a溶剂和流动相差异。比如说,流动相是XX缓冲盐,溶剂是纯甲醇。那么样品从一个纯有机相环境到一个水相环境。一部分...

用高效液相色谱法测量葛根素的浓度,这是用标准品测得的曲线,但出峰前...
答:我觉得这个样品的纯度有问题或者葛根素有异构体。用质谱看一下,那个鼓包峰的分子量和那个尖峰是否相同,就知道了。我觉得是两个物质。可以考虑用0.5%的三氟乙酸试一下。如果甲醇和样品有可能反应,应该试一下乙腈。

请问高效液相色谱仪检测出来的峰面积偏大怎么回事?有没有谁碰到过类...
答:峰面积偏大?你是和什么比峰面积偏大?对照品吗?峰面积偏大就代表浓度偏高。你先检查一下待测样品是不是浓度有点儿高了。现在天气热,如果样品存放时间长,溶剂又是有机溶剂,那么溶剂挥发之后,样品浓度就是会增大的。可以考虑样品冷藏保存。

高效液相色谱定量分析为什么用峰面积比用峰高好
答:被测物是所有的峰都连在一起的簇峰,此时用峰高定量明显不如峰面积,用峰高只能选簇峰的最高点作为响应,而峰面积可以在第一个峰的起始点积分一直积到最后一个峰的结尾,此时的峰面积就比较大,响应会高一些,表现出的灵敏度就会好一些,同理拖尾峰或峰形过胖的时候峰面积也比较准确。

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