高效液相色谱分析法中为什么要采用梯度淋洗
梯度淋洗，就是程序洗脱，简称就是梯度。
主要就是变化流动相比例。主要目的就是为了分离样品，其次还有减短分析时间，改善峰型，提高灵敏度等等。
比如这个梯度，流动相A是磷酸盐水相，B是乙腈
保留时间（min） 乙腈（%）
0 10
20 30
30 30
32 10
40 10
相当于这种状态
就是从0-20min这段时间，逐步往里面加入乙腈，这样的话有助于极性相似的物质分离。如果是里面有一个极性比较小的物质，那么乙腈量增大，这个物质出峰时间就会提前。减短了分析时间。
色谱法（chromatography）又称色谱分析、色谱分析法、层析法，是一种分离和分析方法，在分析化学、有机化学、生物化学等领域有着非常广泛的应用。色谱法利用不同物质在不同相态的选择性分配，以流动相对固定相中的混合物进行洗脱，混合物中不同的物质会以不同的速度沿固定相移动，最终达到分离的效果。
1、色谱的起源
色谱法起源于20世纪初，1906年俄国植物学家米哈伊尔•茨维特用碳酸钙填充竖立的玻璃管，以石油醚洗脱植物色素的提取液，经过一段时间洗脱之后，植物色素在碳酸钙柱中实现分离，由一条色带分散为数条平行的色带。由于这一实验将混合的植物色素分离为不同的色带，因此茨维特将这种方法命名为chromatography，这个单词最终被英语等拼音语言接受，成为色谱法的名称。汉语中的色谱也是对这个单词的意译。
色谱法
茨维特并非著名科学家，他对色谱的研究以俄语发表在俄国的学术杂志之后不久，第一次世界大战爆发，欧洲正常的学术交流被迫终止。这些因素使得色谱法问世后十余年间不为学术界所知，直到1931年德国柏林威廉皇帝研究所的库恩将茨维特的方法应用于叶红素和叶黄素的研究，库恩的研究获得了广泛的承认，也让科学界接受了色谱法，此后的一段时间内，以氧化铝为固定相的色谱法在有色物质的分离中取得了广泛的应用，这就是今天的吸附色谱。
高效液相色谱法测定咖啡因的含量是为什么要排气?
答：是检测饮料中的 咖啡因吧，因为里面有二氧化碳，对结果又影响，还有处理不当还会进入色谱系统，对仪器稳定性和干扰
在高效液相色谱实验前,为什么溶剂和样品都要过滤
答：你说的溶剂是溶解样品用的溶剂？还是说流动相？因为色谱柱里面是多孔结构，所以所有上液相的东西都要过滤。避免把色谱柱堵住。流动相主要是为了过滤掉气泡。尤其是反相色谱，水相和有机相混合很容易产生气泡。样品，包括样品，...
在使用高效液相色谱仪的时候,为什么要走基线,如果不走基线会出现什么情...
答：保留时间不准确，杂峰多，峰型乱。定量结果也会受影响。主要是定量不准确，检测器灵敏度下降 朋友可以到行业内专业的网站进行交流学习！分析测试百科网这块做得不错，气相、液相、质谱、光谱、药物分析、化学分析、食品分析。
高效液相色谱法中样品稀释为什么选用流动相
答：色谱法的实质是样品在流动相与固定相之间反复分配的过程,这个过程在实际中会受到很多因素的影响从而造成分离度下降,理论塔板数降低,使得分离不理想.根据液相色谱Van Deemter方程H = A + Cμ（A为涡流扩散系数,C为传质阻抗...
高效液相色谱法的原理是什么?
答：高效液相色谱法有“四高一广”的特点：①高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。②高速：分析速度快、载液流速快，较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在...
高效液相色谱法在药物分析中的应用
答：高效液相色谱法在药物分析中的应用如下：1、在药物鉴别中的应用 在HPLC法中，保留时间与组分的结构和性质有关，是定性的参数，可用于药物的鉴别，在中国药典中就有大量的药物采用此法进行鉴别。随着高效液相色谱技术的发展和...
高效液相色谱法测定时,流动相合样品均应先过滤和超声波,为什么
答：流动相需要过滤、超声，过滤是除去固体杂质或异物，同时驱除溶解的气体，超声进一步驱除溶解的气体。样品需要过滤，防止不溶性物质堵塞系统的管路，样品不需要超声，超声过程往往伴随温度升高，样品一旦温度升高液体的体积会改变，...
高效液相色谱仪的分离度为什么要大于1.5
答：相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值.也叫分辨率,表示相邻两峰的分离程度.R越大,表明相邻两组分分离越好.1、一般说当R＜1时,两峰有部分重叠；当R=1.0时,分离度可达98 2、当R=1.5时,称为6σ分离,裸露峰面积...
高效液相的原理,最好详细点
答：用不同类型的高效液相色谱分离或分析各种化合物的原理基本上与相对应的普通液相层析的原理相似。其不同之处是高效液相色谱灵敏、快速、分辨率高、重复性好,且须在色谱仪中进行。 高效液相色谱法的主要类型及其分离原理 根据分离机制的不...
高效液相是什么原理?
答：高效液相的原理：液相色谱是一类分离与分析技术，其特点是以液体作为流动相，固定相可以有多种形式，如纸、薄板和填充床等。在色谱技术发展的过程中．为了区分各种方法，根据固定相的形式产生了各自的命名，如纸色谱、薄层色谱...
