梯度洗脱与等度洗脱有何区别?

~

1、洗脱的改变与不改变的配比不同

等度洗脱:流动相的组成比例和流速恒定不变。梯度洗脱:改变流动相的浓度配比。

2、它们的定义不同

等度洗脱定义:液相色谱操作中,等度洗脱即在样品组分的分析周期中,流动相的组成比例和流速恒定不变的洗脱方式。与梯度洗脱对应。

梯度洗脱定义:梯度洗脱又称为梯度淋洗或程序洗脱。在同一个分析周期中,按一定程度不断改变流动相的浓度配比,称为梯度洗脱。


扩展资料:

用梯度洗脱还是等度洗脱,主要看杂质的情况。同一物质有梯度洗脱和等度洗脱两种条件时,梯度洗脱的认可度较高。杂质与杂质、主峰、溶剂峰的分离度一定要好(不好的话就要用梯度洗脱)。

1、杂质和主成分极性相差很大,杂质一定要全部都能洗脱出来(有时等度情况下冲两三个小时杂质也冲出不来,就必须考虑用梯度)。

2、杂质和主成分极性相差较大,杂质出峰太晚(等度冲两个小时出来个杂质,就可以通过梯度缩短检样时间)

3、还有就是杂质极性比主峰的大,等度时要想主峰时间合适杂质全堆在前边,杂质分开主峰又出峰太晚,这种情况也得考虑梯度洗脱。

在能达到较好的分离度的情况下能用等度就用等度,用梯度要麻烦一些。

洗脱要求:

1、洗脱液体积应足够大,一般要几十倍于床体积,从而使分离的各峰不致于太拥挤。

2、梯度的上限要足够高,使紧密吸附的物质能被洗脱下来。

3、梯度不要上升太快,要恰好使移动的区带在快到柱末端时达到解吸状态。目的物的过早解吸,会引起区带扩散;而目的物的过晚解吸会使峰形过宽。

梯度洗脱可分为低压梯度(又称为外梯度)和高压梯度(又称为内梯度)。

(1)、低压梯度装置。低压梯度是采用比例调节阀,在常压下预先按一定的程序将溶剂混

合后,再用泵输入色谱柱系统,也称为泵前混合。

(2)、高压梯度装置。由两台(或多台)高压输液泵、梯度程序控制器(或计算机及接口板控

制)、混合器等部件所组成。两台(或多台)泵分别将两种(或多种)极性不同的溶剂输入混合

器,经充分混合后进入色谱柱系统。

参考资料来源:百度百科-等度洗脱

参考资料来源:百度百科-梯度洗脱



HPLC法中,等度与梯度洗脱有什么区别
答:梯度洗脱:在同一个分析周期中,按一定程序不断改变流动相的浓度配比等度洗脱则是指从头到尾只是用同一个流动相.用不用梯度洗脱,主要看杂质的情况.同一物质有梯度和等度两种条件时,梯度的认可度较高.杂质与杂质、主峰、溶剂峰的分离度一定要好(不好的话就要用梯度).(1)杂质和主成分极性相差很大。

HPLC法中,等度与梯度洗脱有什么区别?两者分别适合怎样组分的分离?
答:在同一个分析周期中,按一定程度不断改变流动相的浓度配比,称为梯度洗脱。从而可以使一个复杂样品中的性质差异较大的组分能按各自适宜的容量因子k达到良好的分离目的。梯度洗脱的优点:1.缩短分析周期;2.提高分离能力;3.峰型得到改善,很少拖尾;4.增加灵敏度。

色谱法的洗脱有哪两种方式
答:用等度洗脱进行色谱分离时,由不同溶剂构成的流动相的组成,如流动相的极性、离子强度、pH值等,在分离的全过程中皆保持不变。用梯度洗脱进行色谱分离时,在洗脱过程中含2种或两种以上不同极性溶剂的流动相组成会连续或间歇地改变,其间可调节流动相的极性,改善样品中各组分间的分离度。使用梯度洗脱时...

请问做液相色谱时在什么样的情况下必须进行梯度洗脱?这跟流动相的种类...
答:梯度洗脱是等度的辅助,但这些年一般的归一化检测已经取代了等度。主要是因为,等度洗脱如果出峰较多时,就会使各峰峰宽出现前窄后宽,积分上也有歧视现象,还有就是等度洗脱有的出峰过早有的过晚,还有的两峰相隔过宽或过窄,这时,梯度的作用就非常明显了。它可以把出峰过早的峰用低有机相-高水相向...

如何判断是否是梯度洗脱?
答:等度洗脱是指流动相的组成在洗脱过程中保持不变,即流动相的组成与时间无关。如果使用等度洗脱,有机相的比率为45%,K'都大于10,化合物与固定相作用的时间较长,导致流动相无法在一个短的时间内将化合物洗脱出来,形成宽峰。梯度洗脱是指流动相的组成随时间而变化,即流动相的组成与时间有关。在...

液相等度泵和梯度泵到底有哪些区别
答:等度洗脱是指实验过程中(做样过程)从头到尾只用一种流动相。也就是只用一个泵,输送同一种流动相。梯度洗脱是指在同一个分析周期中随着时间的变化按一定程序梯度性地改变洗脱液的比例(浓度配比、成分、离子强度、溶液极性等)或pH,以期将层析柱上不同的组分洗脱出来的方法。从而可以使一个复杂样品中...

脱盐过程中,物质洗脱出来的顺序如何,为什么
答:顺序:使用高效液相色谱仪进行分析时,常用两种洗脱方式,先用等度洗脱,再用梯度洗脱。使用梯度洗脱时,也会使干扰分离的强保留杂质组分在较短的时间内从柱中清楚,使色谱柱保持干净状态,以进行下一次的分析。梯度洗脱一般是指流动相的组成随分析时间的延长呈现线性变化,即线性梯度洗脱,可用于反相和正相...

液相方法开发-如何设置梯度洗脱条件(上)
答:梯度洗脱条件的智慧抉择针对未知样品,反相色谱的梯度设置需要精心计算。通过分析洗脱时间、流动相变化等因素,判断是选择等度还是梯度,每个参数如初始比例、梯度速率、结束比例等都是决定因素。实例解析让我们以一个实例来演示:若需要等度洗脱,流动相比例为23:77,运行22.55分钟。若选择梯度洗脱,初始比例...

如果把后面的成分冲出来了 该怎么改梯度
答:梯度洗脱的正确做法,在液相色谱分离条件中,重要的参数就是洗脱条件,其中分离条件又分为等度洗脱和梯度洗脱。在同一个分析周期中,按程序不断改变流动相的浓度配比,等度洗脱则是指从头到尾只是用同一个流动相。用不用梯度洗脱,主要看杂质的情况。同一物质有梯度和等度两种条件时,选梯度较高。杂质与...

梯度洗脱名词解释
答:梯度洗脱名词解释如下:梯度洗脱(gradient elution)又称为梯度淋洗或程序洗脱。在同一个分析周期中,按一定程度不断改变流动相的浓度配比,称为梯度洗脱。在气相色谱中,为了改善对宽沸程样品的分离和缩短分析周期,广泛采用程序升温的方法。而在液相色谱中对组分复杂的样品则采用梯度洗脱的方法。在同一个...

IT评价网,数码产品家用电器电子设备等点评来自于网友使用感受交流,不对其内容作任何保证

联系反馈
Copyright© IT评价网