高效液相色谱仪的最基本组件和梯度洗脱的含义,种类是什么?

在高效液相色谱中梯度洗脱装置的作用是什么~

梯度洗脱装置分两种:
高压梯度:用两台高压输液泵将两种溶剂输入
低压梯度:在常压下将两种溶剂(或多元溶剂)混合,然后用高压输液泵将流动相输入到色谱柱中。
梯度洗脱可提高分离度、缩短分离时间、降低最小检测量和提高分离精度。
但在使用中,梯度洗脱也有许多与等度洗脱不同的地方需要注意。
梯度洗脱时应注意:
1、注意各溶剂间的互溶性。
2、对溶剂的纯度要求更高(影响重现性)。
3、注意梯度变化时系统压力的变化,防止超出限度。
4、梯度结束后,用初始流动相冲洗,使柱子平衡一段时间(再生),使系统回复到初始状态。(梯度周期)
5、低压梯度要注意脱气,混合后容易产生气泡。
6、容易出现鬼峰,应作空白试验。
7、梯度选择时尽量几相之间相变化要小,否则不易平衡。
8、梯度洗脱应使用对流动相组成变化不敏感的选择性检测器(如紫外吸收检测器或荧光检测器),而不能使用对流动相组成变化敏感的通用型检测器(如示差折光检测器)。
9、要注意水相中盐的浓度,防止在有机相提升过程中盐的析出。

一、这个具体还要看你的仪器类型。 15c好像是单泵。如果是这样就不可能进行梯度洗脱。简单地说就是一个通道。不可能设置梯度。当然了,如果是低压二元泵,或者是双泵的话就可以。在梯度洗脱的地方设置:

比如,流速是1.0ml/min
A B
0 10 90
20 50 50
30 50 50
调整梯度的时候
时间 单元
0.01 PUMP FLOW 1.00.01 pump B.CONC 9020.00 PUMP B.COMC 5030.00 PUMP B.COMC 50

二、工具按钮,这个太多……没办法一一解释。如果你是中文版,你把鼠标移到按钮上,上面就会显示功能的。
大约是这个吧:

另外关于批处理的问题。那个和梯度没有关系好不好?批处理一个是用来跑序列的,一个是用来处理图谱的。
如果你们有自动进样器,那么就可以编辑批处理运行序列。其中有几个参数必须要写:
样品瓶,就是瓶号
样品架,架子一般是由1、2两个。有的有一个。
方法:运行的方法。比如你的是序列方法
数据文件:图谱保存的路径和文件的名字
进样体积:一针扎多少?20ul还是10ul
其他的样品的id或者名称都是可写可不写的。


三、液相也不是岛津一家独大。基本上是岛津、安捷伦和Waters并列。岛津胜在性价比。不过安捷伦的国际认可性比岛津好很多。岛津可以改图,安捷伦不可以。所以国外的科研机构、国内的国家企业大多用安捷伦。

如果是新手,光是这么问没办法回答你。岛津会有说明书,上面关于仪器的问题和工作站的问题写得很详细。具体的去参考那个看一下。网上也有电子版的。细节的东西都是从那上面可以学到的。

一、参考百度百科:http://baike.baidu.com/view/971281.htm
 在所有色谱技术中,液相色谱法(liquid chromatography,LC)是最早(1903年)发明的,但其初期发展比较慢,在液相色谱普及之前,纸色谱法、气相色谱法和薄层色谱法是色谱分析法的主流。到了20世纪60年代后期,将已经发展得比较成熟的气相色谱的理论与技术应用到液相色谱上来,使液相色谱得到了迅速的发展。特别是填料制备技术、检测技术和高压输液泵性能的不断改进,使液相色谱分析实现了高效化和高速化。具有这些优良性能的液相色谱仪于1969年商品化。从此,这种分离效率高、分析速度快的液相色谱就被称为高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC),也称高压液相色谱法或高速液相色谱法。

  气相色谱只适合分析较易挥发、且化学性质稳定的有机化合物,而HPLC则适合于分析那些用气相色谱难以分析的物质,如挥发性差、极性强、具有生物活性、热稳定性差的物质。现在,HPLC的应用范围已经远远超过气相色谱,位居色谱法之首。

  高效液相色谱的类型

  广义地讲,固定相为平面状的纸色谱法和薄层色谱法也是以液体为流动相,也应归于液相色谱法。不过通常所说的液相色谱法仅指所用固定相为柱型的柱液相色谱法。

  通常将液相色谱法按分离机理分成吸附色谱法、分配色谱法、离子色谱法和凝胶色谱法四大类。其实,有些液相色谱方法并不能简单地归于这四类。按分离机理,有的相同或部分重叠。但这些方法或是在应用对象上有独特之处,或是在分离过程上有所不同,通常被赋予了比较固定的名称。

  现在的液相色谱仪一般都做成一个个单元组件,然后根据分析要求将各所需单元组件组合起来。最基本的组件是高压输液泵、进样器、色谱柱、检测器和数据系统(记录仪、积分仪或色谱工作站)。此外,还可根据需要配置流动相在线脱气装置、梯度洗脱装置、自动进样系统、柱后反应系统和全自动控制系统等。

  液相色谱仪的工作过程:输液泵将流动相以稳定的流速(或压力)输送至分析体系,在色谱柱之前通过进样器将样品导入,流动相将样品带入色谱柱,在色谱柱中各组分因在固定相中的分配系数或吸附力大小的不同而被分离,并依次随流动相流至检测器,检测到的信号送至数据系统记录、处理或保存。

二、梯度洗脱(gradient elution)又称为梯度淋洗或程序洗脱。在同一个分析周期中,按一定程度不断改变流动相的浓度配比,称为梯度洗脱。
  梯度洗脱(gradient elution)又称为梯度淋洗或程序洗脱。
  在气相色谱中,为了改善对宽沸程样品的分离和缩短分析周期,广泛采用程序升温的方法。而在液相色谱中则采用梯度洗脱的方法。在同一个分析周期中,按一定程度不断改变流动相的浓度配比,称为梯度洗脱。从而可以使一个复杂样品中的性质差异较大的组分能按各自适宜的容量因子k达到良好的分离目的。
  梯度洗脱的优点:1.缩短分析周期;2.提高分离能力;3.峰型得到改善,很少拖尾;4.增加灵敏度。但有时引起基线漂移。
  梯度洗脱的原理:
  流动相由几种不同极性的溶剂组成,通过改变流动相中各溶剂组成的比例改变流动相的极性,使每个流出的组分都有合适的容量因子k,并使样品种的所有组分可在最短时间内实现最佳分离。
  梯度洗脱特点:
  提高柱效,改善检测器的灵敏度。当样品中的一个峰的k值和最后一个峰的k值相差几十倍至几百倍时,使用梯度洗脱效果特别好。梯度洗脱中为保证流速的稳定,必须使用恒流泵,否则难获重复结果。梯度洗脱常用一个弱极性的溶剂A和一个强极性的溶剂B。
梯度洗脱装置示意图2 梯度洗脱示意图1(梯度洗脱参考:http://baike.baidu.com/view/1311799.htm)
如图(两个图一种原理,前者为洗脱装置和柱子之间封闭,适用于配备压力泵的色谱柱,后者为洗脱装置和柱子之间隔离开来,是梯度洗脱的简易装置。):两个容器放于同一水平上,两容器连通,B与柱相连,当溶液由B流入柱时,A中的溶液就会自动来补充,经搅拌与第一容器的溶液相混合,这样流入柱中的缓冲液的洗脱能力即成梯度变化。
  洗脱时应满足以下要求:①洗脱液体积应足够大,一般要几十倍于床体积,从而使分离的各峰不致于太拥挤。②梯度的上限要足够高,使紧密吸附的物质能被洗脱下来。③梯度不要上升太快,要恰好使移动的区带在快到柱末端时达到解吸状态。目的物的过早解吸,会引起区带扩散;而目的物的过晚解吸会使峰形过宽。
  梯度洗脱可分为低压梯度(又称为外梯度)和高压梯度(又称为内梯度)。
  (1)低压梯度装置。低压梯度是采用比例调节阀,在常压下预先按一定的程序将溶剂混
  合后,再用泵输入色谱柱系统,也称为泵前混合。
  (2)高压梯度装置。由两台(或多台)高压输液泵、梯度程序控制器(或计算机及接口板控
  制)、混合器等部件所组成。两台(或多台)泵分别将两种(或多种)极性不同的溶剂输入混合
  器,经充分混合后进入色谱柱系统。

高效液相色谱仪的最基本组件:1、泵 2、检测器 3、进样阀 4、色谱柱
梯度洗脱的含义通俗的讲,就是讲待测样品中过早出峰的物质延迟保留时间,过晚出峰的物质提前保留时间,比如有个混合物,组分1在0.5分钟的时候出峰,而组分2却在50多分钟出峰,这时候就可以使用梯度,将组分1的出峰时间延后,组分2的出峰时间提前,当然梯度洗脱对于杂质分析来说绝不是这么简单的问题。种类有高压梯度(岛津的仪器常用)低压梯度(安捷伦常用)

基本组件是泵、色谱柱、检测器。
梯度洗脱是说:由不同的泵将不同比例的溶剂输送到色谱系统中,这个比例是可调的,叫梯度,比例是单一的,就叫等度。

【仪器设备笔记】高效液相色谱HPLC-定义、原理、部件、类型、用途、图表...
答:【深入探索】高效液相色谱:卓越的科学工具— 定义、原理、组件到应用 在现代化学分析领域,高效液相色谱(HPLC)犹如一颗璀璨的明珠,它将分离、鉴定和定量混合物的复杂过程简化为精准的艺术。让我们一起揭开它的神秘面纱,深入...

液相色谱法的设备
答:高效液相色谱仪由输出泵、进样装置、色谱柱 、梯度冲洗装置、检测器及数据处理和微机控制单元组成。输出泵的功能是将冲洗剂在高压下连续不断地送入柱系统,使混合物试样在色谱中完成分离过程 。常用的进样方式有3种:注射器...

高效液相色谱仪最重要的部件是什么?
答:泵 进样器 检测器 一个都不能少 泵考查保留时间稳定性 进样器和检测器保证峰面积重现性 色谱柱温也会影响保留时间稳定

液相色谱仪的组成部分
答:液相色谱仪根据固定相是液体或是固体,又分为液-液色谱(LLC)及液-固色谱(LSC)。现代液相色谱仪由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分组成。与经典液相柱色谱装置比较,具有高效、快速...

高效液相如何使用
答:所谓柱压稳定并不是指压力值稳定于一个恒定值,而是指压力波动范围在345kPa以内(在使用梯度洗脱时,柱压平稳、缓慢的变化是允许的)。压力过高、过低都属于柱压问题。2.1.1 压力过高 这是高效液相色谱仪在使用中最常见的...

高效液相色谱仪的应用分离方式及主要组成
答:应用:高效液相色谱法应用于化工、医药、食品、环境保护等多个行业的研发及生产工作。分离方式:简单地说,就是吸附,再分配。主要组成:流动相,泵,进样装置,色谱柱,检测器,然后废液。另外连这电脑的工作站进行数据采集...

高效液相色谱仪的基本组成不包括
答:高效液相色谱仪组成不包括:单色器。一、高效液相色谱仪的组成 由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。二、高效液相色谱仪操作步骤 1、过滤流动相根据需要选择不同的滤膜。2、对抽滤后的流动相进行...

高效液相色谱的选型
答:HPLC的出现不过三十多年的时间,但这种分离分析技术的发展十分迅猛,应用十分广泛。其仪器结构和流程多种多样。典型的高效液相色谱仪结构和流程可用下列方框图表示(See Fig.3-4)。高效液相色谱仪一般都具备贮液器、高压泵、...

高效液相色谱仪的基本工作原理
答:关于高效液相色谱仪的基本工作原理这个很多人还不知道,今天来为大家解答以上的问题,现在让我们一起来看看吧!1、高效液相色谱仪的基本工作原理高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分...

高效液相色谱仪结构及原理是什么?
答:转载自分析测试百科网: “高效液相色谱仪结构及原理”高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术上,流动相改为高压输送(最高输送压力可达4.9´107Pa);色谱柱是以特殊的方法用小粒径的...

IT评价网,数码产品家用电器电子设备等点评来自于网友使用感受交流,不对其内容作任何保证

联系反馈
Copyright© IT评价网